作者:李超华 何忠梅 孙娅楠鹿茸蛋白提取
摘要:目的探讨从鹿茸中获得促进神经细胞损伤修复蛋白的最佳提取方法。方法将新鲜鹿茸分别采用匀浆法和超微粉碎法获取鹿茸蛋白混合物(velvet antler proteins,VAPs);用Bradford法及SDS-PAGE检测并比较蛋白含量及蛋白组分差别;用扫描电镜观察不同提取方法超微结构不同。建立1-甲基-4-苯基吡啶离子(1-methyl-4-phenylpyridinium,MPP+)MPP+诱导神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y损伤模型,用该模型观察不同提取方法所得蛋白对损伤恢复的影响。结果超微粉碎法提取的鹿茸蛋白得率更高,得到的蛋白质条带更多,图谱清晰;电镜结果表明超微粉碎法得到的鹿茸蛋白干粉均无细胞结构,且颗粒较细;活性检测中,匀浆法提取的鹿茸蛋白从125μg/m L浓度开始可显著提高1m M MPP+作用下SH-SY5Y细胞的增殖率,而超微粉碎法提取的鹿茸蛋白的最低有效浓度为62.5μg/m L,促增殖率可达到25.45%。结论超微粉碎法既能大量提取鹿茸蛋白又能最大限度保证蛋白促细胞增殖活性,是较为理想的蛋白提取方式。
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