作者:李晓佳 赵迎杰 孙广臣甲氨蝶呤复方风湿宁类风湿性关节炎调节性t细胞
摘要:目的:研究复方风湿宁( compound Fengshining,FSN)联合甲氨蝶呤( methotrexate,MTX)对类风湿性关节炎( rheumatoid arthritis,RA)滑膜成纤维细胞( fibroblast-like synoviocytes,FLS) Treg/Th17免疫平衡的影响。方法体外培养RA FLS,分别用FSN和MTX处理,分为FSN 1、2、3组(0.01、0.1、1.0 mg/mL FSN),MTX 1、2、3组(0.01、0.1、1.0 mg/mL MTX),联合1、2、3组(0.01 mg/mL FSN+0.01 mg/mL MTX、0.1 mg/mL FSN+0.1 mg/mL MTX、1.0 mg/mL FSN+1.0 mg/mL MTX),并以未加药的培养基作为对照组,共10组。采用MTT法检测各组RA FLS增殖情况,Real-time PCR法检测各组IL-10、IL-17、Foxp3、ROR-γt mRNA表达,ELISA检测各组IL-10、IL-17、IL-22水平。结果 FSN各组、MTX各组和联合各组FLS增殖OD值均低于对照组,尤以联合2组降低最显著( P<0.05)。 FSN2组、MTX2组和联合2组IL-10 mRNA、Foxp3 mRNA表达均高于对照组,ROR-γt mRNA表达低于对照组,尤以联合2组变化显著(P<0.05)。 FSN2组和联合2组IL-17mRNA表达均低于对照组,以联合2组降低显著(P<0.05)。 FSN2组、MTX2组和联合2组IL-10水平均高于对照组、IL-22水平均低于对照组,以联合2组变化明显( P<0.05)。联合2组IL-17水平低于对照组( P<0.05)。结论 FSN联合MTX能够抑制RA FLS增殖,升高IL-10、Foxp3表达,降低IL-17、ROR-γt表达,调节Treg/Th17免疫平衡,以0.1 mg/mLFSN+0.1 mg/mL MTX的效应最为明显。
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