作者：刘同祥; 牛建昭; 许惠玉; 屠衡青; 王继峰绿豆胰蛋白酶抑制剂超滤法亲和色谱纯化分离
摘要：目的研究1种高效分离纯化绿豆胰蛋白酶抑制剂（MBTI）的方法。方法采用硫酸抽提,硫酸铵分级沉淀,缓冲液溶解沉淀,用相对分子质量（Mr）为30 000的超滤膜去除大分子蛋白质,Mr为5 000的超滤膜除盐及小分子蛋白质,亲和色谱纯化,得MBTI,高效液相色谱法（HPLC）和SDS-PAGE电泳法分别测定其纯度和Mr,以酪蛋白为底物测其活性。结果纯化的MBTI经HPLC和SDS-PAGE鉴定为2条蛋白质带,其Mr分别为12 000和8 000,其活性约为大豆蛋白酶抑制剂的3倍。结论超滤法与亲和色谱结合能快速高效地分离纯化MBTI。
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