作者：王昌勃; 李琪; 于瑞海; 孔令锋; 于红栉江珧wnt4基因克隆个体发育繁殖周期
摘要：本研究运用同源克隆技术和RACE技术克隆了栉江珧（Atrina pectinata）wnt4基因cDNA全长序列。该基因序列全长为1493bp，其中开放阅读框1074bp，编码由357个氨基酸组成的蛋白。氨基酸序列分析表明，栉江珧wnt4基因具有wnt家族保守结构域，与栉孔扇贝（Chlamys farreri）、海胆（Paracentrotus lividus）等物种具有高度的同源性。荧光定量PCR分析表明，wnt4基因表达具有广泛性和组织差异性，且与性别和性腺繁殖周期相关。wnt4基因表达量与性腺成熟度相关，并且整个繁殖周期卵巢表达量均显著高于精巢，说明wnt4基因参与了栉江珧两性性腺的发育，并在卵巢中发挥更重要的作用。不同发育阶段胚胎荧光定量分析表明，wnt4基因主要参与了栉江珧的早期胚胎发育。在胚胎发育早期（囊胚期和原肠期）wnt4基因的表达水平最高，是成体表达量的500倍；在担轮幼虫和D形幼虫期迅速下降，暗示wnt4基因可能在栉江珧早期发育阶段参与了某些器官的形成。17β-雌二醇诱导实验显示，17β-雌二醇可能通过反馈调节抑制卵巢wnt4基因表达（P〈0．05）；短时间处理，17β-雌二醇能诱导精巢wnt4基因显著表达（P〈0．05）。
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