作者：曲宪成 尚晓莉 程翠 曲学伟 张勇 张开岳 ...黄鳝性腺抑制性差减杂交差减cdna文库
摘要：应用抑制性差减杂交技术构建了黄鳝（Monopterus albus）IV期卵巢和间期性腺的差减cDNA文库。正向差减杂交以间期性腺为试验方,IV期卵巢为驱动方;反向差减杂交以IV期卵巢为试验方,间期性腺为驱动方。将获得的差减cDN段连接质粒载体,然后转化大肠杆菌DH5α,最后获得的正、反向差减文库分别含461、678个重组子。经PCR扩增鉴定插入片段范围为200-2 000 bp。随机选取正、反文库共100个阳性克隆测序分析,得到90个有效基因片段,与GenBank进行BLASTx和BLASTn同源比对。进一步从文库中选取2个基因用于半定量RT-PCR,对文库质量进行验证。结果表明,所建文库能够达到富集这两期性腺差异表达基因的目的。黄鳝性腺差减文库的构建,为进一步分离、鉴定黄鳝性腺发育和性逆转的相关基因奠定了基础。
注：因版权方要求，不能公开全文，如需全文，请咨询杂志社
