作者：曾勇; 陆承平螯虾cdna芯片技术免疫相关基因丝氨酸蛋白酶抑制物
摘要：通过对抑制性差减杂交和cDNA芯片技术分离的201个阳性克隆的测序,得到螯虾(Procambarus clarkii)免疫相关基因48个,其中正向克隆中42个,反向克隆6个,除正向克隆中SNAP-25(synatosome-associated protein of 25 ku)已报道外,其余均为新基因,均在GenBank登录.正向克隆中的同源基因有微管蛋白、超氧化物歧化酶前体、丝氨酸蛋白酶抑制物Ⅰ、精氨酸激酶、70 kD伴侣蛋白同类物等.进一步用Dot Northern blot对克隆号PCI188进行鉴定,结果攻毒组的杂交信号是对照组的3.24倍,与cDNA芯片结果相符.用快速扩增cDNA末端技术扩增克隆号PCI188基因的5'端片段和3'端片段,全长共1 128 bp,编码的蛋白质有277个氨基酸,分子量为30.27 kD.与GenBank序列号X79512软尾太平剌蛄(P. leniusculus)的蛋白酶抑制物Ⅰ(为丝氨酸蛋白酶抑制物)的基因同源性为58.7%,氨基酸同源性为69.7%.该蛋白质有5个重复的结构域,与丝氨酸蛋白酶抑制物Kazal家族的结构域相似.
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