作者:葛志毅; 周建华; 尚佑军; 李学瑞; 刘永生...布鲁氏菌rpa侧流试纸田间检测
摘要:目的为了更加方便布鲁氏菌病(布病)检测,增加布病检测方法的多样性。方法根据布鲁氏菌特异基因的保守序列,设计引物与探针,利用Twist Amp? nfo试剂盒提供的聚合酶扩增体系对布鲁氏菌基因组进行快速等温扩增,扩增产物用PCRD试剂盒侧流试纸进行检测,进而判断结果。其实验过程为确定最佳反应条件,检测特异性和敏感性,并与QPCR同时检测样品,比较符合率。结果 38℃反应10 min为最佳条件,特异性结果良好,敏感性能达到10-5(8拷贝),与QPCR检测结果符合率高,以此建立本方法。结论该方法具有特异性强、敏感性好、操作过程简单、检测快速等优点,增加了布病检测方法的多样性,同时为野外田间布病的检测提供了一种可能。
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