作者：周岩 许学年 程娜 刘榆华 孔令颖 姚恺龄 ...巨片形吸虫病组织蛋白酶l1免疫层析试条elisa诊断
摘要：目的建立快速、简便诊断巨片形吸虫病的胶体金免疫层析试条方法。方法提取巨片形吸虫总RNA,通过RT-PCR获得FgCL1-YN基因片段,并克隆入pET28a（＋）表达载体,异丙基-β-D-硫代半乳糖苷（IPTG）诱导表达得到重组蛋白（r FgCL1-YN）;将r FgCL1-YN和羊抗鼠IgG抗体分别包被于硝酸纤维素膜的适宜位置作为检测带和质控带,以胶体金标记抗人IgG4抗体的鼠单抗作为检测试剂,制备检测特异性IgG4型抗体的免疫层析试条。用该试条检测巨片形吸虫病患者（30份）、日本血吸虫病患者（15份）以及健康人（32份）血清,评价其诊断价值,同时用ELISA法进行平行检测作为对照。结果试条检测法的敏感性为100%（30/30）,特异性为97.9%（46/47）,总体符合率为98.7%（76/77）。ELISA法检测的敏感性、特异性和总体符合率分别100%（30/30）、100%（47/47）和100%（77/77）。试条法与ELISA法的敏感性、特异性和总体符合率,经四格表确切概率法检验,P值分别为1、0.5和0.5,全部大于0.05。显示,试条法与ELISA法检测巨片形吸虫病患者血清的结果高度一致。另外,试条法的检测时间为10min,血清用量低于10μL,且具较高的敏感度。结论以r FgCL1-YN建立的快速诊断胶体金免疫层析试条,检测巨片形吸虫病具有较高的诊断价值。
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