作者：张壮苗 杨春 靳志栋 阿永林 徐蕾 王静娴 ...mtbipr1ppe68dna疫苗免疫应答
摘要：目的构建Iprl／PPE68共表达穿梭质粒pBIPO（pBud-Iprl-PPE68-OriM），探讨其诱导BALB／C小鼠的免疫应答特征。方法将Iprl基因和PPE68编码序列以及结核分枝杆菌（Mycobacterium tuberculosis，MTB）的复制子0riM分别插入质粒pBudCE4．1的多克隆位点，构建共表达穿梭质粒pBIPO，经酶切测序及Western blotting鉴定后，用其免疫BALB／e小鼠，于末次免疫后2w处死小鼠，ELISA法分别检测小鼠血清中lgG2a、IL-12及IFN-γ的水平，流式细胞仪检测CD4^＋和CD8^＋T细胞数量，MTT法检测特异性脾淋巴细胞增殖，同时观察肺脾组织病理学变化。结果酶切测序鉴定PPE68和Iprl基因序列与理论值相符，Western-blotting鉴定PPE68和Iprl蛋白表达成功。质粒pBIPO免疫后小鼠血清中的lgG2a、IFN-γ及IL-12水平与CD4^＋和CD8^＋T细胞表达均呈现出有意义的提高，脾淋巴细胞增殖与BCG组相比差异无统计学意义，肺脾组织未见病理学改变。结论成功构建DNA疫苗（pBIPO），该疫苗能够有效诱导BALB／c小鼠的细胞免疫应答，为进一步研究其抗MTB的免疫保护作用奠定基础。
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