作者：杨建伟 李国清 刘霞 张媛媛 徐前明贝氏隐孢子虫18srrnapcr试剂盒
摘要：目的研制禽类贝氏隐孢子虫的PCR检测试剂盒。方法根据贝氏隐孢子虫18S rRNA和ITS-1序列，选取遗传标记位点最多的一段核苷酸序列作为特异PCR引物的靶序列，设计、合成了一对针对贝氏隐孢子虫的特异性引物（YJwF：5′-ACTGATATACAATACCACG-3′和YR：5′-GCGGATAAAGTTCAGGTTC-3′），对PCR反应条件进行了一系列优化，并分别对试剂盒的特异性、敏感性、稳定性、重复性和保存期等进行了系列研究。结果该试剂盒能特异性地扩增出贝氏隐孢子虫基因组中相应片段，与安氏隐孢子虫，微小隐孢子虫，柔嫩艾美尔球虫等相关原虫基因组DNA无交叉反应；最低能检测到3.48个卵囊；反复冻融50次对试剂盒没有影响；室温条件下至少可保存4个月。结论该试剂盒的各项指标达到了贝氏隐孢子虫的检测要求。
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