作者：李伟; 俞东征; 海荣; 马凤琴; 张建华炭疽芽孢杆菌荧光定量pcr土壤动物脏器
摘要：目的用荧光定量PCR方法检测土壤、动物脏器和血液中炭疽芽孢杆菌，评价并优选目标核酸纯化方法。方法采用TaqMan荧光定量PCR技术，以炭疽芽孢杆菌pagA、rpoB2引物探针和相应外标、内标为手段，比较4种从土壤中检测炭疽菌及3种从感染脏器及血液中检测炭疽菌的方法，探讨环境和组织样品中抑制因素对荧光定量PCR检测的影响，优选并确定纯化检验手段。结果应用NaI裂解glassmilk纯化炭疽菌核酸并用荧光定量PCR检验，检出底限为2．5万拷贝／g土壤（pagA），从血液样本的检出限为1000拷贝／ml。结论荧光定量PCR技术和NaI裂解glassmilk纯化制备模板的联合应用可灵敏、特异地从土壤、血液中检测炭疽芽孢杆菌。
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