作者：陈炜烨; 刘冬冬; 徐建华; 陈丹娜; 何敏; ...imagej分析软件细胞周期依赖性蛋白激酶2原核表达灰度分析
摘要：目的应用Image J软件探索细胞周期依赖性蛋白激酶2（CDK2）在重组质粒pET32a-CDK2中的蛋白表达条件。方法将重组质粒pET32a-CDK2转入表达菌株BL21（DE3）,然后在不同时间点（0、1、2、3、4h）和不同浓度（0.5、1、2 mmol/L）异丙基-β-D-硫代半乳糖苷（IPTG）下诱导表达目的蛋白CDK2,对CDK2采用SDS-PAGE法进行蛋白电泳,并应用Image J软件对电泳条带进行灰度分析。结果 CDK2诱导表达量在不同时间点差异有统计学意义（P〈0.001）,其中0h与1h、2h、3h、4h诱导表达量的差异均有统计学意义（P=0.007,P〈0.001,P〈0.001,P〈0.001）;1h与3h和4h诱导表达量的差异均有统计学意义（P=0.001）;而2h和1h、3h、4h诱导表达量的差异均无统计学意义（均有P〉0.05）;不同浓度IPTG下的CDK2诱导表达量差异无统计学意义（P=0.336,P=0.240,P=1.000）。结论根据Image J软件分析结果,采用0.5 mmol/L浓度IPTG 2h的条件,节约诱导时间和试剂用量。
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