作者：彭杨茜子; 孔瑞娜; 张兰玲; 赵东宝骨关节炎艾拉莫德软骨细胞
摘要：背景Wnt信号通路广泛存在于软骨细胞中,表现为异常活化的状态,从而影响软骨细胞的增殖和凋亡失衡。艾拉莫德作为一种新的抗炎和免疫调节性质的小分子药物,不仅具有抗风湿药物的免疫调节、抑制关节破坏功能,还可影响骨代谢,但尚未见艾拉莫德作用于软骨细胞相关机制的研究。目的基于Wnt/β-catenin信号通路,从细胞、分子水平探讨艾拉莫德对白介素(IL)-1β诱导的大鼠骨关节炎软骨基质代谢的影响及作用机制。方法2017年2-12月选取SPF级雄性2月龄健康Wistar大鼠10只,将大鼠软骨细胞培养至第2代软骨细胞,获得IL-1β诱导的退变软骨细胞模型。将分离培养的软骨细胞分为空白对照组、溶剂对照组、IL-1β组、艾拉莫德A组、艾拉莫德B组、艾拉莫德C组、塞来昔布A组、塞来昔布B组、塞来昔布C组、IL-1β+Dickkopf-1(DKK-1)组、艾拉莫德+DKK-1组、塞来昔布+DKK-1组。采用实时荧光定量反转录聚合酶链式反应和Western blotting法检测各组β-catenin、基质金属蛋白酶(MMP)-13、Ⅱ型胶原a1(Col2a1)、糖原合成酶激酶3β(GSK-3β)mRNA及蛋白表达水平。结果IL-1β+DKK-1组12、24、48、72h的β-catenin mRNA表达水平均低于IL-1β组;IL-1β+DKK-1组0、12、24、48、72h的MMP-13mRNA表达水平均低于IL-1β组;IL-1β+DKK-1组12、24、48、72h的Col2a1 mRNA表达水平均高于IL-1β组。IL-1β+DKK-1组12、24、48、72h的β-catenin、MMP-13表达水平均低于IL-1β组,Col2a1表达水平均高于IL-1β组。加入试验药物24h后,艾拉莫德A组、塞来昔布A组的β-catenin mRNA、MMP-13mRNA表达水平均低于IL-1β组、IL-1β+DKK-1组,Col2a1mRNA、GSK-3β mRNA表达水平均高于IL-1β组、IL-1β+DKK-1组;艾拉莫德+DKK-1组的β-catenin mRNA、MMP-13mRNA表达水平均低于艾拉莫德A组,Col2a1mRNA、GSK-3β mRNA表达水平高于艾拉莫德A组;塞来昔布+DKK-1组的β-catenin mRNA、MMP-13 mRNA表达水平低于塞来昔布A组,Col2a1 mRNA、GS
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