作者：孙蓓; 张丽; 刘晓东; 佟仲生乳腺肿瘤光化学疗法拉帕替尼受体表皮生长因子
摘要：背景光动力疗法(PDT)对增生性疾病有很好的治疗效果,其在抗肿瘤治疗中表现出高效、毒副作用小等优点。拉帕替尼(LAP)是一种口服片剂,主要作用于表皮生长因子受体-1(HER1)和表皮生长因子受体-2(HER2),属于双靶点受体酪氨酸激酶抑制剂。然而目前PDT与LAP联用的协同效应还不是很明确。目的探讨新型光敏剂5-氨基乙酰丙酸(5-ALA)用于PDT对人HER2阳性乳腺癌细胞系SKBR3的抑制情况,并分析其具体机制,同时讨论PDT联合LAP对HER2阳性乳腺癌的治疗效果,以期为HER2阳性乳腺癌的治疗提供实验依据,为相关研究提供参考。方法本研究时间为2016年5月-2017年12月。将对数生长期的HER2阳性乳腺癌细胞系SKBR3随机分为空白对照组(不做干预)、LAP组[分别加入不同浓度梯度(0.50、1.00、2.00、5.00、10.00μmol/L)的LAP]、PDT组[分别加入不同浓度梯度(0.25、0.50、1.00、2.00、4.00 mmol/L)的5-ALA,后给予激光照射]、LAP+PDT组[分别加入不同浓度梯度(0.50、1.00、2.00、5.00、10.00μmol/L)的LAP,再加入不同浓度梯度(0.25、0.50、1.00、2.00、4.00 mmol/L)的5-ALA,后给予激光照射],分别计算LAP和5-ALA的半数抑制浓度(IC50),确定最佳给药浓度及后续研究LAP组、PDT组、LAP+PDT组给药浓度,分别比较各组在最佳给药浓度下24、48 h时的细胞生长抑制率。将对数生长期的HER2阳性乳腺癌细胞系SKBR3随机分为空白对照组(不做干预)、LAP组(加入1.00μmol/L的LAP)、PDT组(加入1.00 mmol/L的5-ALA,后给予激光照射)、LAP+PDT组(加入1.00μmol/L的LAP,再加1.00 mmol/L的5-ALA,后给予激光照射),采用流式细胞术检测各组细胞凋亡情况,Rhodamine123法检测各组绿色荧光强度及线粒体膜电位,Western blotting法检测各组HER2表达水平。结果 LAP的IC50为1.65μmol/L,选取1.00μmol/L(LAP组细胞的生长抑制率为40.12%)为后续研究LAP组、LAP+PDT组给药浓度。5-ALA的IC50为1.57 mmol/L,选取1.00 mmol/L(PDT组�
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