作者：李进领; 李智; 李琳; 张静; 贾延劼; 安颖神经元干细胞骨髓慢病毒属细胞分化
摘要：目的探讨Let-7b在大鼠骨髓间充质干细胞（MSCs）分化为神经元过程中的作用。方法 2013年1—12月将80只SPF级SD大鼠随机分为空白对照组、阴性对照组、Let-7b-up慢病毒载体（LV-rno-Let-7bup）组、Let-7b-inhibition慢病毒载体（LV-rno-Let-7b-inhibition）组,每组20只。将阴性对照组、LV-rnoLet-7b-up组、LV-rno-Let-7b-inhibition组大鼠分别感染EGFP空病毒,采用颈椎脱臼法处死4组大鼠,并获取MSCs,传代培养4代后备用。取传代培养的MSCs感染慢病毒,具体为：空白对照组、阴性对照组不进行感染,LVrno-Let-7b-up组、LV-rno-Let-7b-inhibition组分别感染LV-rno-Let-7b-up、Let-7b-inhibition,采用MTT法检测感染前、感染后24 h、感染后5 d MSCs存活率。采用法舒地尔对4组进行诱导实验,观察MSCs分化为神经元的分化效率。采用免疫组化法检测4组神经元烯醇化酶（NSE）、神经微管结合蛋白（MAP-2）、微管相关蛋白（Tau）水平,RT-PCR法检测4组NSE、MAP-2、Tau mRNA水平。结果 LV-rno-Let-7b-up组MSCs于LVrno-Let-7b-up感染后第3天荧光表达最强,LV-rno-Let-7b-inhibition组MSCs于LV-rno-Let-7b-inhibition感染后第5天荧光表达最强。感染第5天时,阴性对照组、LV-rno-Let-7b-up组、LV-rno-Let-7b-inhibition组MSCs感染率分别为87.46%、86.81%、87.12%。感染后24 h、5 d阴性对照组、LV-rno-Let-7b-up组、LV-rno-Let-7b-inhibition组MSCs存活率低于空白对照组（P〈0.05）;阴性对照组、LV-rno-Let-7b-up组、LV-rno-Let-7b-inhibition组感染后5 d MSCs存活率高于感染后24 h（P〈0.05）。阴性对照组和空白对照组部分MSCs呈现神经元样改变;LV-rno-Let-7b-up组极大部分MSCs出现典型的神经元样结构;LV-rno-Let-7b-inhibition组仅有少量MSCs出现典型的神经元样结构。LV-rno-Let-7b-up组NSE、MAP-2、Tau及其mRNA水平高于空白对照组、阴性对照组（P〈0.05）;LV-rno-Let-7b-inhibition组NSE、MAP-2、Tau及其mRNA水平低于空白对照组、阴性对照组
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