作者：汪枫; 喻小兰; 夏纪毅; 王晓燕; 唐利; 曹...肝肿瘤细胞增殖细胞凋亡黄芩素ly294002
摘要：目的探讨黄芩素和LY294002对人肝癌细胞系SMMC-7721细胞增殖和凋亡的影响。方法 2015年3月—2016年1月,取人肝癌细胞系SMMC-7721,制备细胞悬液。加入黄芩素（1、2、5、10、20、50、100、200、300μmol/L,分别命名为A1、A2、A3、A4、A5、A6、A7、A8、A9组）或LY294002（1、2、5、10、20、30μmol/L,分别命名为B1、B2、B3、B4、B5、B6组）,设定空白对照组和二甲基亚砜（DMSO）对照组,采用CCK8试剂盒检测各组细胞增殖水平;采用20μmol/L黄芩素（C1组）单独处理,20μmol/L黄芩素联合10μmol/L LY294002（C2组）处理人肝癌细胞系SMMC-7721,设定空白对照组和DMSO组,采用流式细胞术检测各组细胞周期;采用2、5、10、20μmol/L黄芩素（分别命名为D1、D2、D3、D4组）处理人肝癌细胞系SMMC-7721,设定空白对照组和DMSO组,采用显微摄影检测各组细胞数量;采用20μmol/L黄芩素（E1组）单独处理,20μmol/L黄芩素联合10μmol/L LY294002（E2组）处理人肝癌细胞系SMMC-7721,设定空白对照组和DMSO组,采用流式细胞术检测各组早期凋亡和晚期凋亡情况;采用20μmol/L黄芩素（F1组）、10μmol/L LY294002（F2组）或20μmol/L黄芩素联合10μmol/L LY294002（F3组）处理人肝癌细胞系SMMC-7721,设定空白对照组和DMSO组,采用实时荧光定量PCR（Realtime PCR）法检测细胞外调节蛋白激酶（ERK）1/2、周期素D1（Cyclin D1）、糖原合成酶激酶-3β（GSK-3β）、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶（AKT）mRNA表达水平;采用20μmol/L黄芩素（G1组）、10μmol/L LY294002（G2组）或20μmol/L黄芩素联合10μmol/L LY294002（G3组）处理人肝癌细胞系SMMC-7721,设定空白对照组和DMSO组,采用Western blotting法检测磷酸化ERK1/2（P-ERK1/2）、Cyclin D1、磷酸化GSK-3β（P-GSK-3β）、磷酸化AKT（P-AKT）表达水平。结果 A8组、A9组、B6组细胞增殖水平低于空白对照组、DMSO对照组（P〈0.05）。C2组G0/G1期、G2/M期细胞比例高于空白对�
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