作者：贾永森; 林清; 秦丽娟; 张艳丽; 刘春秋; ...食管肿瘤血瘀证脾气虚证血清ec9706细胞
摘要：目的：通过研究噎膈血瘀证、脾气虚证患者及健康人血清对食管癌 EC9706细胞增殖、磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）/蛋白激酶B（Akt）/核因子kappaB（NF-κB）信号通路相关分子mRNA及蛋白表达的调控，探讨噎膈血瘀证、脾气虚证的分子机制。方法本研究于2014年6—12月选择来源于唐山市人民医院、迁安燕山医院肿瘤内科的病理确诊的食管鳞癌患者。按照《中华人民共和国中医药行业标准———中医病症诊断疗效标准》确定噎膈血瘀证或脾气虚证标准，选取血瘀证、脾气虚证患者各10人，另选取健康志愿者10人（来自两院体检人员）。将EC9706细胞于37℃，5％饱和湿度的二氧化碳（ CO2）培养箱孵育24 h，饥饿24 h，分别加入倍比梯度的噎膈血瘀证、脾气虚证患者和健康人血清，噻唑蓝（MTT）染色法检测细胞增殖变化；实时荧光定量聚合酶链反应（PCR）检测PI3K、Akt、NF-kB表达；免疫印迹（Western blot）法检测PI3K/Akt/NF-κB信号通路相关分子蛋白表达。结果血瘀证患者血清刺激细胞的50％增殖率为71.1μl/ml，脾气虚证为118.0μl/ml；血瘀证患者血清上调细胞 PI3K、Akt 和NF-κB mRNA表达水平，与各对照组比较差异有统计学意义（ P﹤0.05），脾气虚证患者血清无上调mRNAs作用；血瘀证患者血清促进细胞表皮生长因子受体（EGFR）、PI3K、Akt、磷酸化的蛋白激酶B（p-Akt）和 NF-κB等蛋白表达水平增高，与各对照组比较差异有统计学意义（ P﹤0.05），脾气虚证患者血清无促进此五蛋白表达作用。结论噎膈血瘀证患者血清能够促进细胞增殖，该证候的分子机制可能与PI3K/Akt/NF-κB信号通路过度激活有关；脾气虚证患者血清无刺激细胞增殖作用，其证候分子机制有待探讨。
注：因版权方要求，不能公开全文，如需全文，请咨询杂志社
