作者:张磊; 邵晨; 赵艳芳; 张景霞; 马向东; 邵...肝炎病毒乙型滋养层细胞adr亚型转染
摘要:目的通过转染adr亚型HBV—DNA,建立可复制HBV的人胎盘滋养层细胞(HPT-8)。方法采用脂质体介导的方法将重组真核表达质粒pcDNA3—3HBV转染人胎盘滋养层细胞,经G418筛选,通过ELISA、免疫组化、PCR等方法对转染细胞和培养上清分别进行检测。结果HPT-8细胞稳定转染质粒pcDNA3—3HBV后,第1、2代转染细胞的培养上清ELISA检测显示HBsAg、HBeAg阳性,免疫组化检测显示转染细胞胞浆中HBsAg、HBcAg呈阳性信号,PCR检测培养上清中HBV—DNA呈阳性,荧光定量PCR检测其滴度达9×10^6拷贝/L,并且转染滋养细胞中有HBV—rcDNA和HBV—cccDNA存在。结论重组质粒pcDNA3—3HBV能在人滋养层细胞中表达、转录、复制。
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