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水蛭对Ang-Ⅱ刺激鼠肝星状细胞活化Ca^2+效应的抑制作用

作者:李校天; 杨书良; 王军民; 段海凤; 王天轶肝硬化肝星状细胞水蛭激光扫描共聚焦显微镜胞浆游离钙

摘要:目的 研究水蛭药物血清是否具有抑制肝星状细胞(HSCs)胞浆游离钙([Ca^2+]i)增高的作用。方法 将32只健康SD大鼠按随机数字表随机分为4组:肝纤维化模型水蛭组(8只):皮下注射用精制橄榄油配制的40%CCl4溶液9周,然后灌服水蛭6d;肝纤维化模型对照组(8只):皮下注射用精制橄榄油配制的40%CCl4溶液9周,然后灌服0.9%氯化钠溶液6d;正常大鼠水蛭组(8只):仅皮下注射等量的精制橄榄油9周,然后灌服水蛭6d;正常对照组(8只):仅皮下注射等量的精制橄榄油9周,然后灌服0.9%氯化钠溶液6d。结束后,经下腔静脉取血并分离血清。采用盲法用上述10%血清培养HSCs24h并负载好Fluo-3/AM后使用激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)检测HSCs[Ca^2+]i。结果 (1)经正常大鼠水蛭组及肝纤维化模型水蛭组大鼠血清预处理的HSCs,其[Ca^2+]i荧光强度相对值均明显低于肝纤维化模型对照组(P〈0.05);且两者与正常对照组间差别也均有显著性意义(P〈0.05)。(2)经正常大鼠水蛭组及肝纤维化模型水蛭组大鼠血清预处理HSCs后加入Ang—Ⅱ(1.1×10^-7mol/L),HSCs[Ca^2+]i荧光强度变化百分数显著低于肝纤维化模型对照组(P〈0.01)。结论 水蛭能抑制肝星状细胞活化[Ca^2+]i的升高,此可能是其发挥抗肝纤维化作用的重要途径之一。

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