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TGF-β诱导人肝癌细胞系凋亡信号转导机理的研究

作者:王春雷; 黄志强; 万远廉; Kevin; Behrns凋亡肝癌细胞系信号转导途径

摘要:目的探讨转化生长因子β1(TGF-β1)诱导人肝癌细胞系凋亡及其与β53基因及Smad4的关系。方法选用3种含有不同β53基因状态的人肝癌细胞系,均分为TGF-β1诱导组(实验组)和对照组;应用脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的dUTP缺口末端标记技术(TUNEL)对TGF-β1诱导的肝癌细胞的凋亡进行定量检测;另外,应用Lipofectamine 2000把含有Smad4结合元件和荧光素酶基因的TGF—β1可诱导的荧光素酶报告质粒对细胞进行转染,再经TGF-β1作用,分别检测其相对荧光素酶活性。结果在应用TUNEL检测的3个细胞系中,TGF—β1能诱导HepG2细胞(野生型β53)凋亡,其细胞凋亡率实验组明显高于对照组(P〈0.05);而Huh-7(突变型β53)和Hep3B细胞(缺失型β53)凋亡细胞较少,其细胞凋亡率实验组与对照组差异无统计学意义(P〉0.05)。荧光素酶检测提示,HepG2细胞的Smad4表达活性实验组明显高于对照组(P〈0.05);而Huh-7和HepB细胞的Smad4表达较低,实验组与对照组差异无统计学意义(P〉0.05)。结论Hep2细胞系比Huh-7和HepB细胞系更易发生TGF-β1诱导的凋亡.Smad4是TGF-β1信号转导途径的主要调控因子之一。

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中国普外基础与临床

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