作者:丁守怡; 闫志勇; 宋旭霞; 李慧娟; 钱冬萌...性传播疾病病毒低密度基因芯片聚合酶链反应核酸杂交
摘要:目的采用聚合酶链反应(PCR)结合反向杂交技术建立检测常见病毒性性病病原体的低密度基因芯片。方法将HIV-1,HSV-2,HPV6,HPV11的特异性寡核苷酸探针加尾并以一定阵列固定在尼龙膜上,经过处理后制成低密度芯片。在扩增过程中用Biotin-16-dUTP标记扩增产物,产物变性后分别与点有各种探针的尼龙膜反向杂交,杂交结果采用链霉亲和素-碱性磷酸酶(SP-AP)显色系统检测,并对检测体系的敏感性和特异性进行了测试。结果4种探针只与其对应的DNA杂交,而不和其他病毒杂交。敏感性试验可检出20fg的病毒DNA。结论低密度基因芯片具有特异、敏感、快速等优点,采用低密度基因芯片一次杂交就可同时筛选鉴定多种性传播疾病(STDs)病毒的感染,值得临床推广应用。
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