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海岛棉GbNPR1基因全长cDNA的克隆及其在烟草中的表达

作者:王旭静; 窦道龙; 王志兴; 贾士荣海岛棉npr1基因转基因烟草赤星病抗病性

摘要:[目的]为棉花抗黄萎病基因工程育种提供新的基因源.[方法]以海岛棉为材料,利用同源序列法和RACE技术克隆海岛棉中SAR途径的主要抗病信号元件NPR1(none expresser of PR gene)的全长cDNA序列.[结果]推导的氨基酸序列与已知NPR1的同源性较低(39%~57%),但在功能区的同源性较高(79.2%),GbNPR1蛋白中含有BTB和锚蛋白重复序列结构域,且在起始密码子上游存在2个W框.在拟南芥中,A.tNPR1起始密码子上游有3个W框,对诱导NPR1的表达和激活NPR1介导的植物防卫反应至关重要,锚蛋白重复序列则是NPR1实现其功能必不可少的.构建了组成型植物表达载体,通过农杆菌介导法导入烟草,转基因植株经PCR和Southern杂交检测,表明目的基因已整合到烟草基因组中.离体叶片接种法对转基因烟草进行抗病性鉴定,表明对烟草赤星病菌(Alternaria alternata)的抗性有明显提高.转基因烟草经T1代遗传分析发现,基因以单拷贝插入.[结论]本研究得到的基因为海岛棉中NPR1的同源基因.

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中国农业科学

《中国农业科学》(半月刊)创刊于1960年,由中华人民共和国农业农村部主管,中国农业科学院;中国农学会主办,CN刊号为:11-1328/S,自创刊以来,颇受业界和广大读者的关注和好评。 《中国农业科学》为综合性农牧业科学学术刊物。主要发表我国农牧业科学在基础理论和应用技术方面的学术论文、重要科研成果和专题报告及各学科研究进展综述等读者对象为农牧业科技工作者、农业院校师生和农业管理干部。

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