作者:王广君; 张杰; 吴隽; 宋福平; 黄大昉苏云金芽孢杆菌cry1ba3蛋白活性区小菜蛾杀虫晶体蛋白基因片段特异性引物pcr扩增氨基酸
摘要:通过对Cry1Ba3蛋白序列的分析,以及与已知Cry蛋白比较,设计了6对特异性引物,通过PCR扩增获得6种不同长度的cry1Ba3基因片段.将这些基因片段克隆到pET-21b载体上,导入大肠杆菌BL21中进行诱导表达,最终得到6种不同长度的Cry1Ba3蛋白片段.采用浸叶法检测这些蛋白片段对小菜蛾的杀虫活性,研究结果表明含有第1~685位和含有第22~655位氨基酸的蛋白片段对小菜蛾的毒性,与全长Cry1Ba3蛋白相比,没有改变;含有第54~655位氨基酸的蛋白片段对小菜蛾的毒力明显降低;而含有第22~627位和含有第85~655位氨基酸的蛋白片段完全丧失了对小菜蛾的活性.上述结果表明Cry1Ba3蛋白对小菜蛾的活性区在第22~655位氨基酸之间.
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