作者：葛建忠; 尹亚昕; 蒋肖; 刘伟娜; 姚斌; 罗...葡萄糖氧化酶枝抱菌sl19基因克隆基因表达性质研究
摘要：葡萄糖氧化酶(G0X)已广泛应用于各种工业生产中。目前,除了曲霉和青霉属来源的G0X夕卜,鲜有新型G0X被报道。经基因克隆和序列同源性分析,C/oz/osporium tianshanense SL19来源的葡萄糖氧化酶基因CtgoxB是一个新基因,该基因全长1707 bp,无内含子,编码568个氨基酸,N-端第1~16个氨基酸为信号肽,与已报道的GOX序列最高一致性为35%。CtgoxB在毕赤酵母中实现异源表达,但重组蛋白C/GOXB未检测到GOX活性。通过序列和结构分析,同源重组构建的突变体CzGOXB-Cl最终恢复了GOX活性。经SDSPAGE鉴定,重组蛋白CrGOXB-Cl表观分子量约为120 kDa,大于理论分子量(61.6 kDa)o经酶学性质测定,CzGOXB-Cl比活为123.8 U/mg,在pH 8.0和30咒条件下具有最高的酶活,且在10七时依然维持65%的酶活,具有嗜低温特性。CtGOXB-Cl在pH 6.0-9.0条件下保温1 h后,剩余酶活维持在80%以上,可以在中碱性条件下维持较高酶活,并且对表面活性剂SDS具有较强的抗性。这些性质表明CtGOXB-Cl在水产饲料和洗涤剂等行业中具有良好的应用潜力。
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