作者：李兰; 郑其升; 张元鹏; 李鹏成; 肖希龙; ...猪表面活性蛋白a杆状病毒表达猪繁殖与呼吸综合征病毒抗病毒活性
摘要：为研究重组猪肺表面活性蛋白A（RpSP—A）的抗病毒活性，采用Bac—to—Bac系统对RpSPA蛋白进行表达。首先PCR扩增目的基因并将其克隆至pFast Bacl转移栽体获得pFast—SP—A，通过转化DHl0Bac感受态细胞获得重组Bacmid，然后转染sf9细胞获得重组杆状病毒rBV—SP—A，在sf9细胞上进行目的蛋白的表达，经镍柱纯化、脱盐柱处理后，采用蚀斑减少方法评价RpSP—A对PRRSV感染Marc145细胞的抑制作用。结果显示RpSPA在sf9细胞中得到正确表达，并且能够降低PRRSV在Marc-145细胞上的感染，补加Ca2＋时30μg／mLRpSP—A抑制率高达77％，15ttg／mLRpSP—A抑制率为43％，未补加Ca2＋时RpSP—A没有表现出抑制作用。上述结果表明利用Bac—to—Bac系统可以稳定获得大量具有抗PRRSV作用的可溶性RpSP—A。
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