作者:贾蒙骜 陈兴江 林叶春 商胜华烟草茄科劳尔氏菌flic基因环介导的等温扩增
摘要:针对烟草青姑病的防控,开发快速、高效的病原菌检测方法是必要的.环式等温扩增(LAMP)是一种在等温条件下快速完成靶标基因扩增的新方法.将青枯病菌贵州分离株FQY4基因组序列(NCBI号:CP004013)与其他已发表菌株序列比对分析,确定编码鞭毛蛋白的fliC基因的保守区域可被选作检测靶标.根据LAMP原理以及靶标序列的特点,设计了一组由6条引物组成的环式等温扩增反应体系.结果表明:61℃条件下孵育45 min,可完成对青枯病病原菌单菌落和带菌烟草叶片的检测,结果判定可以通过廒色变化被肉眼直接识别,也可以通过琼脂糖凝胶电泳检测.通过这种新方法,可以实现对青枯病菌菌落的快速鉴别,还可以用于对田间疑似带病烟草植株的快速检测.
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