作者：许信刚; 胡建和; 张彦明猪瘟病毒e2基因表达试验初报动物免疫真核细胞载体介导重组逆转录病毒载体dna重组技术流式细胞技术e2蛋白流式细胞仪单克隆抗体sp2基因插入囊膜蛋白病毒感染阳性细胞csfv免疫小鼠石门株
摘要：利用DNA重组技术将猪瘟病毒(CSFV)石门株囊膜蛋白E2基因插入逆转录病毒载体pBABE-puro中构建成重组逆转录病毒载体pBABE-puro-E2,该重组逆转录病毒表达载体与pVSVg质粒经磷酸钙共转染法将其转入293GP细胞中包装逆转录病毒假病毒.用包装的假病毒感染SP2/0细胞,经嘌呤霉素筛选阳性细胞后进行流式细胞技术(FACS)分析,结果表明CSFVE2基因在SP2/0细胞膜上成功表达.将表达E2蛋白的SP2/0细胞腹腔免疫BALB/c小鼠,用流式细胞仪检测证明,成功诱导小鼠产生了抗E2蛋白的抗体.为下一步利用细胞免疫小鼠研制抗猪瘟病毒单克隆抗体打下基础.
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