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不同化学激活剂对牛卵丘细胞重构胚发育的影响

作者:王滇 张春燕 刘松柏 杨利国卵母细胞胞质内直接注射重构胚化学激活

摘要:本文主要研究了①离子霉素(Ion)+6-二甲基氨基嘌呤(6-DMAP)、②Ion+放线菌酮(CHX)、③体积分数7%乙醇+6-DMAP、④体积分数7%乙醇+CHX四种不同化学激活方法对牛胞质内卵丘细胞全细胞注射法所获得重构胚的激活及前期发育的影响。Ion和7%乙醇的处理时间为5min,6-DMAP的处理时间为4h.CHX的处理时间为5h。结果表明,重构胚与颗粒细胞单层细胞共培养2d后,各组卵裂率分别为52.7%、51.5%、53.2%和54.0%.差异不显著(P〉0.05);培养8d后,①组激活的囊胚发育率(20.0%)极显著高于其他组(P〈0.01),其他各组之间差异不显著.分别为8.5%、10.2%和6.1%;培养10d后,①组激活的囊胚孵化率(10.7%)极显著高于其他组(P〈0.01).其他各组之间差异不显著,分别为2.3%、3.0%和1.8%。表明,4种激活方法均可以有效地激活重构胚,但Ion+6-DMAP法激活重构胚的囊胚率和囊胚孵化率均极显著高于其他3组,说明Ion+6-DMAP激活法有利于牛重构胚的发育.可以获得较理想的囊胚率.是胞质内全细胞注射法克隆的理想激活方法。

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