作者：干惠珠; 张桂珍; 张凤春; 卜丽莎; 杨绍娟...rnai绿色荧光蛋白乳腺肿瘤shrna表达载体
摘要：目的：探讨靶向增强型绿色荧光蛋白（EGFP）小发夹结构RNA（Short hairpin RNA，shRNA）对耐阿霉素的人乳腺癌细胞（MCF-7／AdrR）中EGFP基因表达的抑制作用。方法：构建针对EGFP基因的shRNA表达载体，与pcDNA3．0 EGFP质粒共转染MCF-7／AdrR细胞，分别用激光共聚焦扫描显微镜（Laser confocal scanning microscope，LCSM）和流式细胞术检测干扰效果。结果：瞬时共转染pSilencer^TM3．1-H1 neo EGFP shBNA质粒和pcDNA3．0 EGFP质粒后，荧光显微镜观察结果显示MCF-7／AdrR细胞中发出荧光的细胞数量减少，荧光强度明显降低。流式细胞术检测阳性细胞百分率降低至35．6％，差异有显著性。结论：靶向EGFP的shRNA表达质粒能有效而特异抑制EGFP在MCF-7／AdrR中的表达，MCF-7／AdrR细胞中存在RNA干扰现象，为进一步利用RNA干扰技术逆转乳腺癌多药耐药性的研究奠定基础。
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