作者:翁秀芳; 吴雄文; 梁智辉; 蔡蕾; 费世江; ...生物素化bira抗原特异性ctl
摘要:目的:构建有功能的sHLA-A*0201-抗原肽四聚体,建立一套HLA Ⅰ类分子/抗原肽的四聚体制备技术。方法:利用基因工程及体外折叠技术构建sHLA-A*0201-LMP2A426-434复合物分子,并在BirA酶的作用下生物素化。与荧光标记的亲和素衍生物以分子数4:1结合而形成HLA-A*0201-LMP2A426-434四聚体。获得的四聚体对长期混合淋巴细胞培养中增殖的抗原特异性CTL进行检测,同时用细胞毒实验验证。结果:荧光标记的亲和素与生物素化的HLA-A*0201-抗原肽复合物分子正确结合,制备的四聚体能够与长期混合淋巴细胞培养出的特异性T细胞结合。结论:从结构与功能上证实成功地获得有功能的HLA-A*0201-抗原肽复合物四聚体。为进一步研究T细胞识别机制与功能奠定了基础,也为过程复杂的HLA-抗原肽四聚体制备提供了可行的免疫学监控方法。
注:因版权方要求,不能公开全文,如需全文,请咨询杂志社