作者：王晓文; 杨子义; 王金凤; 蔡欣; 徐滔; 邹...葡激酶表位目的基因随机表位库
摘要：目的:用目的基因随机表位库方法寻找葡激酶(straphylokinase SAK)的显性表位.方法:①SAK免疫BALB/C小鼠,免疫亲和层析纯化抗血清后,抗SAK抗体用生物素标记;②构建SAK随机表位肽库,随机挑取12个独立克隆测序,分析库DN段的分布和碱基含量情况;③以多抗为靶蛋白用克隆原位杂交法筛选肽库;④构建SAK的缺失突变体mSAK,Westernblot分析mSAK的免疫反应性.结果:①筛选肽库得到一个由19个氨基酸组成的免疫显性表位区,命名为A1区;②mSAK不能与抗SAK多抗反应.结论:用简便、有效的方法筛选得到了SAK的一个表位A1区,初步确定A1区是SAK引起免疫反应的重要区域.
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