作者：王晓祺; 谭岩; 段秀梅; 刘玲丽; 方艳秋; ...靶细胞细胞毒cfse流式细胞仪流式细胞术标记孵育百分率自然死亡筛选
摘要：目的:建立一种用流式细胞仪测定细胞介导细胞毒活性的方法.方法:用羧基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺酯(CFSE)标记靶细胞,再用碘化丙碇(PI)标记DNA筛选细胞膜已破坏的靶细胞.效靶比为100:1～6.25:1,共孵育时间为1～6小时,流式细胞仪收集1 000个靶细胞并测定被杀细胞的百分率.结果:CFSE是合适的标记靶细胞的荧光染料,18小时后也能很好地区分效靶细胞;靶细胞的自然死亡率低于5%;杀伤百分率随着效靶比和共孵育时间的增加而增加.最佳效靶比为50:1～25:1,共孵育时间为2～4小时.结论:CFSE/PI双荧光染料标记的流式细胞分析检测细胞毒具有多个优点:避免放射性试剂的应用,敏感性增强,单细胞水平的分析.
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