作者：孙海燕; 金作霖; 张永宽; 林珠牙囊牙齿萌出甲状旁腺相关蛋白骨保护素核心因子kappb受体激活剂破骨细胞形成
摘要：目的：建立人牙囊细胞（Human dental follicle cells，HDFCs）与人外周血单核细胞（Peripheral blood monocytes，PBMCs）共培养体系，研究体外培养人牙囊细胞表达的骨保护素（Osteoprotegerin，OPG）和核心因子kappB受体激活剂（Receptor activator of nuclear factor-kappa B ligand，RANKL）对破骨细胞表型分化的影响。方法：取健康成人外周血分离出单核细胞，同时分离12～14岁青少年第三磨牙牙囊进行原代培养，建立两种细胞共同培养系统。实验分七组：A、单核细胞；B、单核细胞＋牙囊细胞（接触）；C、单核细胞＋牙囊细胞（接触）＋集落刺激因子-1（Colony stimulating factor-1，CSF-1）＋甲状旁腺相关蛋白（Parathyroid hormone—related protein，PTHrP）；D、单核细胞＋牙囊细胞（不接触）；E、单核细胞＋RANKL＋CSF-1：F、单核细胞＋RANKL＋CSF-1＋牙囊细胞（不接触）；G、单核细胞＋RANKL＋CSF-1＋牙囊细胞（不接触）＋anti—OPG。把每组细胞接种到预置玻片和牙本质片的24孔板中培养，观察细胞变化。培养第10天，取出玻片，进行抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）染色，计数每组TRAP染色阳性细胞；第14天取出牙本质片，扫描电镜下观察骨陷窝形成情况。结果：B、F组可见少量破骨样细胞，A、D组无破骨样细胞，E组破骨样细胞分化最显著，C、G组破骨样细胞较E组略少，但无显著性差别（P〉0．05），与其他各组差别显著（P〈0．05）。结论：实验结果证实体外培养人牙囊细胞表达的RANKL和OPG分别对破骨细胞表型分化具有正向和负向调节作用。
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