作者：张世新; 杨松林; 万伟东; 史毅; 邓辰亮; ...转录因子sp1细胞活力成纤维细胞
摘要：目的：研究针对转录因子SP1的圈套寡脱氧核苷酸（Decoy-Oligodeoxynucleotide，Decoy—ODN）对小鼠胚胎成纤维细胞（NIH3T3）的活力和Ⅲα1胶原基因表达的影响，探讨圈套寡脱氧核苷酸用于病理性瘢痕基因治疗的可能性及机理。方法：设计合成针对SP1的特异性哑铃形Decoy-ODN。用阳离子脂质体转染NIH，T，细胞。分别用流式细胞仪检测ODN转染效率，激光共聚焦显微镜观察ODN在细胞中的分布，电泳迁移率变动分析（electrophoretic mobility shift assay，EMSA）验证ODN与SP1的特异性结合。用WST-8检测ODN对细胞活力的影响。用RT—PCR检测ODN对细胞胶原基因表迭的抑制作用。结果：分别转染25nM、50nM、100nM、150nM SP1 Decoy-ODN，48h后，细胞活力依次为0．9331±0．0203、0．7479±0．0868、0．577±0．0347、0．4703±0．0147；转染100nM SP1 Decoy-ODN可明显抑制Ⅲα1胶原mRNA的表达（P〈0．01），抑制效果达60％。结论：Decoy—ODN可以通过拮抗核转录因子SP1的活性而抑制NIH3T3细胞的活力和Ⅲα1胶原基因的表达。
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