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快速贴壁法分选表皮干细胞及其评价

作者:刘虎仙; 贾赤宇; 付小兵; 胡大海表皮干细胞分选

摘要:目的:认识表皮干细胞对Ⅳ型胶原的黏附特性,评价重复利用Ⅳ型胶原以快速贴壁法在分选表皮干细胞中的作用。方法:未包波胶原培养瓶的细胞作为对照组Ⅰ,首次Ⅳ型胶原和三次Ⅳ型胶原包被的培养瓶分别作为实验组Ⅰ和实验组Ⅱ,将包被Ⅳ型胶原并曾黏附细胞的培养瓶消化后作为实验组Ⅲ。人角质形成细胞分别接种其上,15min后对贴壁细胞进行显微摄像并计数,数据用SAS软件分析。对贴壁细胞的生长及增殖活性进行明察,并用β1整合素、K19对贴壁的细胞进行鉴定。结果:与对照组相比,胶原包被纽的贴壁细胞数明显增多(PS 0.05),并于5天铺满培养瓶底,而对照组12天后仍未铺满瓶底。各实验组细胞15min贴壁数无明显差异(p>0.05)。贴壁细胞β1整合素和K19表达阳性。结论:表皮干细胞对Ⅳ型胶原具有较好的黏附特性,利用快速贴壁法可以得到较高纯度的表皮干细胞,重复利用Ⅳ型胶原对表皮干细胞的黏附特性几乎无影响并可节约费用。

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