作者：卢宁; 王刚; 刘玉峰; 李承新; 李巍; 张海...基因工程反应定位细胞内抗角蛋白抗体fab抗体人角质形成细胞噬菌体抗体库抗hbsagfab片段细胞染色法其临床应用人源性大肠杆菌质粒转化特异表达定位方法诱导表达纯化鉴定微镜观察免疫荧光作用时间不同浓度
摘要：目的:探索一株基因工程人源性抗角蛋白Fab抗体在培养的角质形成细胞内的反应定位.方法:利用从噬菌体抗体库中筛选到的特异表达抗角蛋白Fab片段的质粒转化大肠杆菌,IPTG诱导表达出Fab抗体,纯化鉴定后将该抗体作用于培养的人角质形成细胞,在不同浓度和不同的作用时间应用免疫荧光细胞染色法及共聚焦显微镜观察该抗体在角质形成细胞内的反应定位,同时以基因工程抗HBsAg人Fab和1%BSA为对照.结果:基因工程人源性抗角蛋白Fab抗体作用于角质形成细胞的胞浆,呈明显的绿色荧光,着色均匀,细胞核未见着色,两种对照均未见着色.结论:基因工程人源性抗角蛋白Fab抗体,可与培养状态下的角质形成细胞胞浆中其特异性的抗原相结合,这为其临床应用奠定了基础.
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