作者：万学东; 王博; 陈群力; 李三强; 席守民胰岛素抵抗活性氧ros褪黑素胰岛素受体
摘要：目的探讨褪黑素（MT）对软脂酸（PA）诱导L02细胞胰岛素抵抗的防护作用及机制。方法培养L02细胞,分别设立对照组（BSA组）、PA组、PA＋MT组、PA＋维生素C（Vit C）组。各组药物浓度和孵育时间根据不同的实验需要来确定。用荧光比色法测定各组细胞胞内氧自由基（ROS）水平,Western印迹法检测胰岛素刺激后胞内胰岛素信号蛋白磷酸化水平,包括Y-p-胰岛素受体（IR）、Y-p-胰岛素受体底物（IRS）1/2以及应激敏感激酶p-JNK水平。结果用不同浓度的PA处理L02细胞24 h,细胞内ROS生成量呈现明显的浓度依赖关系,差异有统计学意义（P〈0.05）;用0.3 mmol/L的PA处理L02细胞不同时间,细胞内ROS生成量存在明显的时间依赖关系,在24 h达到最高,并在36 h后仍维持较高水平（P〈0.05）;与BSA组相比,PA组ROS含量明显升高（P〈0.05）PA＋MT组ROS含量无明显变化（P〉0.05）;PA＋MT组ROS生成量明显低于PA组（P〈0.05）。PA＋Vit C组与PA组相比,ROS的生成量减少,但仍高于PA＋MT组（P〈0.05）。与BSA组相比,PA组Y-p-IR、Y-p-IRS1/2磷酸化水平减少,而p-JNK磷酸化水平升高;与PA组相比,PA＋MT组Y-p-IR、Y-p-IRS1/2磷酸化水平显著升高,p-JNK磷酸化水平明显降低（P〈0.05）。结论 PA导致细胞内ROS增加,MT能够清除PA产生的过量ROS。MT通过减少JNK的活化,改善因ROS引起的胰岛素信号传递损伤,对PA诱导的胰岛素抵抗具有防护作用。
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