作者：汪坤福; 朱贵明; 张涛; 孙洁; 江旭东; 王...d4基因表达载体中国仓鼠卵巢细胞
摘要：目的探讨优化、合成原生动物Δ4-脂肪酸去饱和酶基因,并构建其哺乳动物表达载体,将基因导入卵巢细胞（CHO）中进行初步表达。方法目的基因经优化后人工合成全长编码区,利用双酶切连接法将其连入哺乳动物表达载体pcDNA3.1（-）。采用脂质体法稳定转染CHO细胞后应用PCR和RT-PCR法检测Δ4-脂肪酸去饱和酶基因的整合和表达情况。结果成功构建了Δ4-脂肪酸去饱和酶基因的表达载体pcDNA3.1-D4,并整合进CHO细胞基因组,实现了该基因在CHO中的表达。结论原生动物Δ4-脂肪酸去饱和酶基因哺乳动物表达载体的成功构建以及Δ4-脂肪酸去饱和酶基因表达后的分析为下一步深入研究Δ4-脂肪酸去饱和酶基因的功能和转基因动物的制作打下了基础。
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