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表浅性膀胱癌细胞中DNA核酸内切酶ERCC1及膜连蛋白-1的表达及与顺铂耐药的关系

作者:关云哲; 杨东彪; 王振中表浅性膀胱癌顺铂ercc1基因耐药

摘要:目的探讨表浅性膀胱癌细胞中DNA核酸内切酶ERCC1基因的表达在介导顺铂(Cisplatin)耐药中的作用。方法用分步诱导法在体外建立耐Cisplatin不同浓度、不同天数表浅性膀胱癌细胞KU7和253JB-V(0nmol/L,0d;0.4nmol/L,30、75d;0.8nmol/L,30d)和T24(0nmol/L,0d;0.2nmol/L,90d)。MTT方法检测Cisplatin对建立的耐药株细胞系的半数抑制浓度(Ic50);RT-PCR方法检测ERCCl、膜连蛋白-1(Annexin-1)mRNA的表达变化。结果MTr结果显示:Cisplatin作用96h后,耐药株细胞的耐药程度明显增强;对KU7耐药株细胞、253JB-V耐药株细胞和T24耐药株细胞而言,KU7+0.4nmol/LCisplatin(75d)和KU7+Cisplatin0.8nmol/L(30d)对Cisplatin的敏感性下降,其IC50由0.8nmol/L(0nmol/L,0d)逐步增高到1.45nmol/L;同样的情况也发生在253JB.V耐药株细胞和T24耐药株细胞中。RT-PCR结果显示:KU7耐药株细胞、253JB-V耐药株细胞的ERCClmRNA表达增多,且在高浓度和天数多时更为明显,Annexin-1基因无明显变化。124耐药株细胞中ERCCl基因及An-nexin-1基因均无明显变化。结论成功地在体外诱导了耐Cisplatin不同浓度的KU7耐药株细胞、253JB-V耐药株细胞各两株,T24耐药株细胞一株。其中KU7耐药株细胞、253JB-V耐药株细胞ERCCI基因的表达量随着加药浓度和天数的增加而增多,Annexin-1基因无明显变化。T24耐药株细胞的ERCCl基因及Annexin-1基因表达均无明显的变化。

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