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过氧化损伤及抗氧化能力时间动态变化与造血干/祖细胞衰老的相关性

作者:耿珊; 张琛; 徐春燕; 姜蓉; 王璐; 王建伟...祖细胞超氧化物歧化酶谷胱甘肽超氧化物丙二醛

摘要:目的探讨增龄过程中小鼠Sea-1+造血干/祖细胞(Sea-1+HSC/HPC)过氧化损伤及抗氧化能力的动态变化与其衰老的关系。方法C57BL/6J雄性小鼠分为幼年组(3~4周龄),青年组(2月龄),中年组(6月龄),中老年组(12月龄),老年组(18月龄)。提取各组小鼠骨髓单个核细胞,免疫磁性吸附细胞分选法(MACS)分离纯化Sea-1‘细胞群,wsT法检测细胞超氧化物歧化酶(SOD)含量,TNB显色法检测细胞总谷胱甘肽(GSSG+GSH)含量,WST-1法检测超氧化物含量,硫代巴比妥酸法检测丙二醛(MDA)含量,衰老相关p-半乳糖苷酶(SA—B—gal)染色观察各年龄组阳性细胞百分比,造血祖细胞混合集落培养比较各年龄组Sea-1+细胞形成集落能力。结果总SOD活力值、GSSG+GSH含量、超氧化物含量吸光度、MDA含量、SA-B-Gal阳性细胞百分比及混合集落形成率分别在幼年组为(27.51±1.11)U/g、(28.78±0.77)panol/L、(0.114±0.005)、(2.06±0.54)nmol/mg、(2.26±0.65)%、(8.79±0.56);青年组为(38.23±3.50)U/g、(31.48±2.03)μmol/L、(0.109±0.005)、(0.81±0.35)nmol/mg、(9.08±2.74)%、(9.48±0.74);中年组为(28.85±0.65)U/g、(47.62±4.93)μmol/L、(0.133±0.002)、(2.69±O.62)nmol/mg、(11.58±0.89)%、(5.14±0.89);中老年组(12.67±O.89)U/g、(25.63±1.23)μmol/L、(0.151±0.009)、(11.44±1.19)nmol/mg、(35.34±2.50)%、(1.56±0.23);老年组为(17.52±1.27)U/g、(39.10±2.19)μmol/L、(O.141±0.005)、(7.06±0.95)nmol/mg、(15.76±1.23)%、(O.98±0.50)。结论随年龄增加Sea-1+HSC/HPC的SA-β-Gal阳性细胞百分比逐渐增高,混合集落形成能力下降,SOD活性、GSSG+GSH含量逐步降低,而�

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