作者：张燕 杨光 孙国珍仙灵骨葆含药血清细胞培养共培养体系
摘要：目的观察不同浓度仙灵骨葆含药血清在成骨细胞（OB）破骨细胞（OC）共同培养体系中对小鼠OB、OC功能的影响。方法取小鼠OB系MC3T3-E1与小鼠单核巨噬细胞RAW 264.7诱导成的破骨样细胞,建立细胞上清相通但细胞间不相互混杂的OB-OC共育体系,实验分为不同浓度（高、低）的仙灵骨葆含药血清组和空白对照组,光镜观察OB矿化结节及OC骨吸收陷窝数并计数,收集共育体系中1、3 d培养上清液,采用ELISA法测定OPG、RANKL的含量。结果从形态和功能活性证实培养细胞为OB和破骨样细胞;三组细胞培养7 d后,可见仙灵骨葆高浓度组矿化结节计数值明显高于其余两组（P〈0.01）,低浓度组高于空白对照组（P〈0.05）。三组细胞培养7 d后,空白对照组骨吸收陷窝数明显多于其余两组（P〈0.01）,而仙灵骨葆高浓度组与低浓度组无显著性差异。三组培养液上清中OPG/RANKL比较,1 d后仙灵骨葆高浓度组与低浓度组比值显著高于空白对照组（P〈0.05、P〈0.01）,3 d后仙灵骨葆高浓度组明显高于其余两组（P〈0.05、P〈0.01）,且低浓度组明显高于空白对照组（P〈0.05）。结论仙灵骨葆含药血清可促进共育系统中OB形成矿化结节的能力;减少破骨样细胞在骨磨片上形成吸收陷窝的能力;可影响体外培养OB-OC的功能调控信号系统,提高OPG/RANKL的比例,并呈现时间和剂量依赖性。
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