作者：李燕 宋耀明 卢巍 任可 李莹腺病毒ant1基因血管平滑肌细胞凋亡
摘要：目的构建大鼠线粒体蛋白ANT1基因的腺病毒载体,并检测其在体外培养的血管平滑肌细胞（VSMCs）中的表达。方法将大鼠线粒体膜蛋白腺（嘌呤核）苷酸移位酶（adenine nucleotide translocase,ANT）1基因片段克隆至穿梭质粒pShuttle-GFP-CMV上,在细菌中将穿梭质粒和pAdXsi载体进行重组,经脂质体转染HEK293细胞对重组腺病毒包装、扩增,用其感染体外培养的VSMC。采用PCR方法对重组体腺病毒进行鉴定,荧光显微镜观察转染效率。用Western印迹检测转染后ANT1在VSMC中的表达。结果酶切鉴定及PCR结果表明ANT1基因重组腺病毒载体构建成功,病毒滴度达2×1011pfu/ml,Western印迹检测ANT1在VSMC中表达明显高于对照组（P〈0.05）。结论成功构建了含大鼠ANT1基因的重组腺病毒载体并在VSMCs有效表达,为以后将Ad-ANT1应用于VSMCs凋亡的研究奠定了基础。
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