作者：孙晓军 金磊 甘志勇 刘冬高尿酸血症尿酸酶peg修饰稳定性
摘要：目的研究天然尿酸酶与PEG化尿酸酶的基本特性,为治疗高尿酸血症相关疾病药物做基础研究。方法用相对分子量5kD,活化基团为羟基琥珀亚氨的PEG作为专一性修饰剂对尿酸酶进行修饰,采用常规酶学分析方法,分别研究天然尿酸酶与PEG化尿酸酶的动力学参数,并比较修饰前后对抑制剂黄嘌呤的敏感性、最适温度、最适pH值、37℃时的稳定性以及在体半衰期等方面的差异。结果经PEG修饰后尿酸酶最适温度由30℃升为35℃,最适pH无改变仍为pH8.7;在37℃水浴下,24h后活性保留由40%增至70%,酶稳定性提高,体内半衰期由45min延长至11h;测定尿酸酶和PEG化尿酸酶的Km分别为32.40、36.34μmol/L,黄嘌呤对尿酸酶与PEG化尿酸酶抑制常数分别为4.72、11.30μmol/L。结论假丝酵母尿酸酶经PEG5kD修饰后有药用潜力。
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