作者:杨春辉 杜珍武 卜丽莎 尹维田碱性成纤维生长因子骨髓间充质干细胞基因稳定表达
摘要:目的构建人碱性成纤维生长因子(bFGF)真核表达载体,观察其在人骨髓间充质干细胞(MSCs)内的表达。方法应用RT-PCR从人胎盘组织中扩增出bFGF,并将其构建于pcDNA3.1真核表达载体上。利用脂质体将基因转染MSCs内,利用G418进行基因的表达筛选,通过RT-PCR和Western blot进行基因表达的检测。结果扩增出人bFGF基因成功构建在bFGF-pcDNA3.1真核表达载体上。经G418筛选转染的MSCs存活十代以上。经RT-PCR及Western blot检测发现转染bFGF-pcDNA3.1真核表达载体的MSCs能够大量稳定表达bFGF。结论构建的bFGF-pcDNA3.1真核表达载体可在MSCs内得到稳定的表达。
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