作者：华声瑜 赵桂峰 郭茂娟 范英昌丹酚酸b骨髓间充质干细胞心肌样细胞基因
摘要：目的探讨丹参单体丹酚酸B（Salvianolic acid B，Sal B）在体外诱导大鼠骨髓间充质干细胞（MSCs）分化为心肌样细胞的情况及Nkx2．5、GATA-4、Desmin和α-actinmRNA的表达，确定大鼠MSCs体外诱导为心肌样细胞的条件、规律及转化细胞的特点。方法选用成年近交系Wistar大鼠，利用percoll分离液进行密度梯度离心法和直接贴壁法进行分离、提纯MSCs，并进行培养扩增。免疫组化方法对第9代MSCs表面抗原进行鉴定。分别应用10μmol／L5-氮胞苷（5-aza）及250ing／LSalB联合5-aza（5-aza＋SalB）对第9代的MSCs进行联合诱导24h，于诱导后第4周，用实时荧光定量RT—PCR法检测Nkx2．5、GATA-4、Desmin和α-actin的基因表达。结果①第9代MSCs免疫组化染色CD44呈阳性表达，CD34呈阴性表达。②诱导4W后，细胞体积变小，可见由几个细胞连接形成的多核肌管样结构。5-aza组、5-aza＋SalB组均出现明确的心肌早期分化基因；与5-aza组相比，5-aza＋SalB组的Nkx2．5、GATA-4、Desmin和α-actinmRNA的表达明显增强。结论SalB具有促进5-aza诱导的MSCs向心肌样细胞分化的作用，并且在Nkx2．5基因表达上SalB的优势更加明显。
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