作者:徐沛然 杨志广 赵慧敏 邵国光骨桥蛋白肺癌反义基因治疗
摘要:目的探讨骨桥蛋白(OPN)反义基因对肺癌细胞增殖和浸润转移的影响。方法(1)PCR扩增获得人OPN基因,pcDNA3.1(+)载体连接。酶切、测序。(2)脂质体介导将pcDNA3.1-ANOPN基因转入ECA109,G418筛选获得稳定表达ANOPN基因的转染细胞A54-ANOPN,及表达空载体的A54-vect细胞,空白对照A54。RT-PCR检测mRNA。体外观察对比各组间倍增时间、黏附、侵袭及迁移能力的差异。结果成功构建了pcDNA3.1-ANOPN质粒,测序结果与GenBank中公布的序列同源性为100%。与A54-vect、A54相比,A54-ANOPN细胞OPN mRNA表达明显降低;倍增时间增加;黏附、侵袭及迁移能力明显降低。结论ANOPN基因的稳定表达明显抑制肺癌细胞的恶性表型。
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