作者:时阳; 杨广民; 李首庆; 马寅芙; 谭岩共表达dna疫苗
摘要:目的构建MAGE-1与IL-18共表达质粒pcIL-18-MAGE并进行体外验证表达。方法设计合成MAGE-1与IL-18引物,PCR扩增其基因片段,分别构建以pcDNA3为载体的小鼠IL-18重组质粒和人MAGE-1重组质粒,pcCMV-IL-18与MAGE-1的PCR产物酶切连接构建共表达质粒pcIL-18-MAGE。脂质体法将构建的重组质粒转染293细胞,RT-PCR和Western印迹法验证MAGE-1和IL-18在转化细胞中的表达。结果成功获得共表达质粒pcIL-18-MAGE,RT-PCR可见目的条带,Western印迹显示转染MAGE-1与IL-18的细胞在蛋白质水平上均有表达。结论成功地构建出既表达mIL-18又表达MAGE-1的共表达质粒pcIL-18-MAGE。
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