作者:杜建时; 赵晴; 刘卓; 王嘉桔纤溶酶原激活物肝癌细胞系
摘要:目的 探讨纤溶酶原激活物抑制剂(PAI)的发卡样小干扰RNA(siRNA)真核表达载体对人肝癌HpG2细胞组织型纤溶酶原激活物(tPA)和尿激酶PA(uPA)表达的影响。方法设计短发夹状PAI siRNA的寡核苷酸链,将其插入到真核细胞表达载体pSilencerTM2.1-U6neo载体中构建重组载体后,采用脂质体转染方法将构建的重组载体导人人肝癌细胞HpG2中,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)、Western印迹法分别检测转染细胞PA1mRNA和蛋白对tPA和uPA表达的影响。结果转染后细胞中PA1含量降低,tPA和uPA的表达减少(均P〈0.01)。结论 测序结果表明发卡样的PAlsiRNA真核表达载体转染HpG2细胞后获得稳定表达,并可特异性封闭PA1的表达,PA1siRNA能有效阻断PA1的蛋白合成,同时抑制细胞中tPA和uPA的表达。
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