作者：田梅; 朴春姬; 赵宝峰; 李修义; 苏旭trail细胞凋亡细胞存活膀胱癌ej细胞
摘要：目的 构建可溶性肿瘤坏死因子（TNF）相关凋亡诱导配体TRAIL基因表达载体并研究其瞬时转染对肿瘤细胞凋亡的影响。方法 采用重叠延伸PCR法克隆含有TNF-α信号肽的人TRAIL基因，并将其连入pUCm-1载体。测序正确后克隆入表达载体pcDNA3．1中。采用Gene-Companion^TM非脂质体型聚阳离子转染试剂体外瞬时转染人膀胱癌EJ细胞，RT—PCR法检测目的基因mRNA水平的表达，Western blot检测细胞培养上清中目的基因的表达，流式细胞术检测细胞凋亡，克隆形成实验检测细胞存活。结果 成功构建了可分泌表达的人可溶性TRAIL表达载体，体外转染TRAIL的EJ细胞凋亡率均显著高于未转染细胞及转染空载体细胞的凋亡率，并明显抑制细胞存活，细胞存活率为51.34％，明显低于末转染细胞及转染空载体的细胞存活率。结论 所构建的可溶性TRAIL表达载体转染肿瘤细胞可诱导细胞凋亡及抑制肿瘤细胞的生长存活。
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