作者：彭依群; 翟木绪; 邓小戈; 隋国良; 王敏; ...cdna代表性差异分析法雌激素基因
摘要：目的 筛查17β雌二醇（E2）诱导MG-63细胞下调表达cDN段，寻找MG-63细胞中E2相关基因，探讨雌激素的骨保护作用机制。方法 用改良cDNA代表性差异分析法筛查E2干预MG-63细胞表达下调的cDN段，Southern杂交和快速Northern杂交分析cDN段来源后。克隆到pGEM-Teasy载体，蓝白筛选挑取阳性克隆进行测序和同源性比较分析。最后选取部分阳性差异表达克隆行Northern杂交分析。结果 得到2个表达下调的cDNA条带，证实差异表达cDN段经E2干预后表达下调。随机挑取20个克隆测序得到19个序列，分别代表14个不同基因，均与已知基因高度同源，这些基因与骨基质形成、转录信号转导及细胞分化发育调节等相关，其中1个克隆经Northern杂交证实其受E2干预表达下调。结论 cDNA代表性差异分析法可快速筛查差异表达基因。MG-63细胞受E2诱导下调表达的部分基因可能参与了雌激素介导的骨重建过程从而起到骨保护作用。
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